Triton X100 中文全称聚乙二醇辛基苯基醚，属于非离子型表面活性剂，在生物化学实验里面最核心作用是破膜裂解细胞，溶解细胞膜脂质成分，释放细胞内部蛋白核酸等内容物，同时它还具备乳化 增溶 降低表面张力的能力，广泛用在蛋白提取 Western Blot 免疫组化 ELISA 这类实验体系当中，很多新手容易把它和离子型去污剂弄混，Triton X100 最大特点是不带电荷，对蛋白天然结构影响相对温和，不会像 SDS 那样让蛋白完全变性，这也是它在很多蛋白活性相关实验里面优先选用的关键原因。之所以可以实现细胞裂解，是因为它分子同时拥有亲水端和亲油端，可以插入细胞膜磷脂双分子层，把脂质分散成胶束，让细胞膜结构破碎，细胞内物质释放出来。学习的时候第一步识别它的类别是非离子表面活性剂，第二步区分它裂解 增溶 乳化三类核心功能，第三步掌握它在不同实验里面的使用浓度，第四步对比同类去污剂差异，最后记住安全使用要点，这样就能完整掌握 Triton X100 的作用，做实验的时候可以正确选择试剂。

一 基础信息

试剂名称 Triton X100

化学类别 非离子型聚醚类表面活性剂

外观 常温下是淡黄色粘稠液体

常见使用形态 原液，实验前按需配成水溶液

核心属性 低变性 增溶 细胞膜通透

二 核心作用分场景说明

三 深度原理讲解

Triton X100 分子结构分为两部分，一端是疏水的辛基苯基，另一端是亲水的聚乙二醇长链，这种双亲结构就是表面活性剂的基础。当它接触细胞膜磷脂双分子层，疏水部分插入脂质区域，亲水部分留在水相，持续作用之后磷脂被拆分成胶束，细胞膜就失去完整屏障，也就是实验所说的通透或者裂解。

因为它属于非离子型，分子整体不带电荷，所以不会改变蛋白的带电性质，很多需要保留蛋白抗原活性 酶活性的实验都会选择它，如果换成 SDS 这种离子型去污剂，蛋白会快速变性失活，就不适合活性检测实验。

四 和同类去污剂对比

五 实验使用注意要点

1 浓度不能盲目加高，浓度过高会破坏蛋白结构，还会干扰后续抗体结合

2 配制缓冲液的时候，Triton X100 原液粘度很高，吸取的时候要慢，避免移液不准

3 该试剂有刺激性，接触皮肤眼睛会产生刺激，操作需要佩戴手套护目镜

4 部分下游质谱实验，Triton X100 会干扰质谱检测，这类实验需要提前去除残留

六 拓展补充

Triton X100 现在部分地区已经列入管控，很多实验室开始寻找替代试剂，但是传统生化教学 老文献里面仍然大量使用 Triton X100，所以教材考试依旧重点考察 Triton X100 的作用。

【常见问题】

问题 1 Triton X100 的作用是不是让蛋白变性

回答 1 不是，Triton X100 属于非离子表面活性剂，Triton X100 的作用主要是裂解细胞膜增溶脂质，性质温和，一般不会让蛋白彻底变性，这点和 SDS 有本质区别。

问题 2 免疫组化里面 Triton X100 的作用是什么

回答 2 免疫组化当中 Triton X100 的作用是通透细胞膜，打孔让抗体穿透细胞膜进入细胞，识别胞内抗原，这是免疫组化实验非常经典的 Triton X100 的作用。

问题 3 Triton X100 和 Tween20 都属于非离子去污剂，Triton X100 的作用更强吗

回答 3 是的，Triton X100 的作用强于 Tween20，Triton X100 细胞膜裂解通透能力更强，Tween20 更多用于洗板，主要降低非特异吸附，很少用来强力裂解细胞。

问题 4 蛋白提取实验 Triton X100 的作用是什么

回答 4 蛋白提取实验当中 Triton X100 的作用是裂解细胞，溶解细胞膜脂质，把胞内蛋白释放到裂解液当中，同时温和增溶膜蛋白，是提蛋白裂解液非常常用的组分。

【免责申明】

本文属于生化试剂科普讲解，实验操作请严格按照实验室 SOP 以及试剂原厂说明书执行，本文内容不能替代专业实验人员指导，化学品操作请注意防护。